真菌檢測的質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)
2021-04-30 11:44 作者:洛辰 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
低免疫人群的增長、超廣譜抗生素的廣泛應(yīng)用使真菌感染迅速增加,侵襲性念珠菌及曲霉感染使重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)的病死率明顯上升,50-75%的病例不能在生前獲得細(xì)菌學(xué)的陽性結(jié)果,因此加強(qiáng)真菌檢測的規(guī)范化操作,提高檢測陽性率及藥敏試驗(yàn)的正確率十分必要。
(一) 真菌涂片的規(guī)范化
真菌涂片是真菌鑒定最重要的方法,真菌檢驗(yàn)人員應(yīng)熟悉真菌的形態(tài)特點(diǎn);無菌體液標(biāo)本涂片應(yīng)離心濃縮以增加陽性率,并一定要檢測菌絲;對痰及口腔標(biāo)本要進(jìn)行定量(菌落計(jì)數(shù))或半定量(用加號表示,在分區(qū)劃線的3個區(qū)都豐富生長報(bào)告為+++、依次類推2個區(qū)生長為++、1個區(qū)生長為+);組織標(biāo)本涂片要研磨后涂片但要保護(hù)菌絲體的形態(tài);在標(biāo)本量許可的前題下涂片不應(yīng)少于3張。
(二) 真菌鑒定的規(guī)范化
對酵母樣真菌如念珠菌或隱球菌在常規(guī)臨床細(xì)菌室已有較成熟的方法學(xué),可用顯色培養(yǎng)基或自動化系統(tǒng)鑒定真菌;常規(guī)鑒定絲狀真菌主要依賴于其生長過程中形態(tài)變化和特點(diǎn),所以要求從事絲狀真菌檢測的檢驗(yàn)人員應(yīng)作專業(yè)短期培訓(xùn);任何實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)建立規(guī)范的涂片鑒定方法,要正確區(qū)分酵母樣真菌或絲狀真菌、毛霉菌和曲霉(有頂囊),對不常見的真菌不要輕易作為污染菌報(bào)告,
(三) 真菌藥敏的質(zhì)量保證
建立稀釋法藥敏試驗(yàn),報(bào)告MIC值的報(bào)告對臨床更有參考價(jià)值;必須正確掌握終點(diǎn)判斷標(biāo)準(zhǔn),氟康唑、伊曲康唑、氟胞嘧定等藥物終點(diǎn)允許有20%真菌生長而兩性霉素B應(yīng)無真菌生長作為終點(diǎn);對無折點(diǎn)的抗真菌藥物藥敏試驗(yàn)報(bào)告可只報(bào)告MIC,不能報(bào)告敏感度。鑒定真菌到種水平是臨床用藥的重要的參考。
(四) 要重視組織標(biāo)本的培養(yǎng)
首先要無菌采集組織標(biāo)本,接種前要無菌作適當(dāng)粉碎將組織內(nèi)的菌絲體暴露。每一份組織標(biāo)本必須同時(shí)做涂片和培養(yǎng)。
(五)開展非培養(yǎng)方法的真菌檢查試驗(yàn),如-D葡聚糖和或診斷曲霉菌的GM試驗(yàn),用于區(qū)別真菌、曲霉菌或細(xì)菌感染。