一、概念與臨床意義

冷凝集實(shí)驗(yàn)主要用于由肺炎支原體引起的原發(fā)性非典型性肺炎的輔助診斷。參考值：凝集價(jià)≤1：32；臨床意義：由肺炎支原體感染引起的原發(fā)性非典型性肺炎患者的血清中常含有較高的寒冷紅細(xì)胞凝集素，簡(jiǎn)稱冷凝集素，它能與患者自身紅細(xì)胞或“O”型人紅細(xì)胞于4℃條件下發(fā)生凝集，在37℃時(shí)又呈可逆性完全散開。75％的支原體肺炎病人，于發(fā)病后第二周血清中冷凝集素效價(jià)達(dá)1：32以上，一次檢查凝集價(jià)>1：64或動(dòng)態(tài)檢查升高4倍以上時(shí)，有診斷意義。

二、實(shí)驗(yàn)操作步驟

玻璃試管10支，分別加入生理鹽水200微升，第一支加入待測(cè)血清200微升，混勻后取出200微升加入第二支試管，依次倍比稀釋到第九支試管，取出200微升棄去；同時(shí)準(zhǔn)備好2%“O”型紅細(xì)胞500微升，操作離心后“O”型紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次，取離心洗滌后的紅細(xì)胞100微升加入4.9毫升的生理鹽水中即可。最后加入200微升配好的紅細(xì)胞到10支試管中，混合后放入4℃冰箱中3小時(shí)后判斷凝集現(xiàn)象。

三、冷凝集實(shí)驗(yàn)相關(guān)知識(shí)

1、多數(shù)正常人體內(nèi)都有低效價(jià)的自身冷凝集素，但效價(jià)低，反應(yīng)溫度范圍也小，無(wú)臨床意義。

2、有臨床意義的自身冷凝集素一般有高效價(jià)和反應(yīng)溫度范圍高的特點(diǎn)，可致自身免疫性溶血，如CAS.它的發(fā)生可能是急性或慢性的。急性常繼發(fā)于淋巴組織增生如淋巴瘤或肺炎支原體感染；慢性的常在老年人中發(fā)生。天氣冷時(shí)可發(fā)生雷諾現(xiàn)象和血紅蛋白尿。

3、冷反應(yīng)性自身冷凝集素通常是IgM，當(dāng)外周循環(huán)溫度比較低時(shí)，結(jié)合到紅細(xì)胞上，并且使得補(bǔ)體致敏紅細(xì)胞。當(dāng)紅細(xì)胞循環(huán)回到溫暖部位時(shí)，IgM從紅細(xì)胞上放散下來，但是補(bǔ)體被保留著。在循環(huán)紅細(xì)胞上出現(xiàn)的補(bǔ)體成分是C3，有些是C4.所以在幾乎所有的病例中，補(bǔ)體是紅細(xì)胞上唯一要測(cè)定的蛋白。

4、在極少的病例中冷反應(yīng)性自身抗體是IgG，它可能不結(jié)合補(bǔ)體。如果在DAT的所有階段在冷條件下進(jìn)行，使用冷鹽水和冷抗球蛋白試劑，否則IgG可能被遺漏掉。

5、自身冷抗體的特異性可能是抗-HI、抗-I、抗-i，罕見抗-Pr或其他(Gd，SdX)特異性。