一氧化氮合酶染色液操作步驟
2021-09-24 14:01 作者:洛辰 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
產(chǎn)品名稱:一氧化氮合酶染色液
儲存條件:4℃,避光,6個(gè)月
規(guī)格:5×20ml/5×50ml
用途:一氧化氮合酶染色,也稱作NOS染色液
注意事項(xiàng):主要由四氮唑藍(lán)孵育液、陰性對照組成。染色后酶活性部位呈藍(lán)色沉淀。
產(chǎn)品簡介:
細(xì)胞中的左旋精氨酸和氧在一氧化氮合酶(Nitxic oxide synthase,NOS)的作用下生成一氧化氮和瓜氨酸。還原型輔酶Ⅱ(NADPH)是一氧化氮合酶的輔酶,可將底物脫氫,然后將氫傳遞給硝基四氮唑藍(lán)(NBT),NBT會被還原成藍(lán)黑色沉淀,該沉淀部位即為NADPH所在部位即NOS部位。
一氧化氮合酶染色液由磷酸鹽緩沖、漂洗、孵育、復(fù)染等步驟,可用于組織冰凍切片染色,尤其適用于腦組織冰凍切片染色,亦可用于細(xì)胞爬片、細(xì)胞涂片染色。該染色液僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
自備材料:
1、30%蔗糖
2、4%多聚甲醛
3、濕盒、恒溫箱、顯微鏡
染色結(jié)果:
NOS部位 藍(lán)黑色
背景 紅色(中性紅)或淡藍(lán)色
注意事項(xiàng):
1、應(yīng)選擇恰當(dāng)?shù)墓潭ㄒ?、固定方法、固定時(shí)間,否則會影響酶的活性。
2、中性紅復(fù)染可以更好的顯示細(xì)胞輪廓,有助于進(jìn)一步計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞率。
3、組織切片染色時(shí),可見NOS神經(jīng)元,類似于Golgi銀染,胞體、神經(jīng)纖維、纖維末梢均可著色。
4、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:6個(gè)月有效。