雙縮脲試劑(AB液)操作步驟
2021-12-22 14:28 作者:洛辰 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
產(chǎn)品名稱:雙縮脲試劑(AB液)
規(guī)格:100ml/500ml
分類:蛋白檢測
儲存條件:室溫,12個月
用途:較為粗略的驗(yàn)證蛋白質(zhì)的存在方法,多用于定性檢測蛋白質(zhì)
注意事項(xiàng):如果組織里含有蛋白質(zhì)或具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng),顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。
簡介:
雙縮脲是一種用于分析蛋白質(zhì)的方法,雙縮脲反應(yīng)的原理是在呈藍(lán)色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下,銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復(fù)合物,呈紫色。所產(chǎn)生的顏色密度與參與反應(yīng)肽鍵數(shù)成比例,可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為。雙縮脲法測定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離子螯合劑影響,對于血清總蛋白的雙縮脲分析,膽紅素、脂類、血紅蛋白、葡聚糖具有一定干擾作用。
雙縮脲試劑(AB液)由Biuret Reagent A、Biuret Reagent B組成,如組織里含有蛋白質(zhì)或具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng),顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。該試劑是較為粗略的驗(yàn)證蛋白質(zhì)存在的方法,多用于定性檢測蛋白質(zhì)。
操作步驟(僅供參考):
1、先將BiuretReagentA3ml加入待測樣品3ml,振蕩均勻,以便產(chǎn)生堿性環(huán)境。
2、加入2~3滴BiuretReagentB,振蕩均勻,如果組織里含有蛋白質(zhì)或具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可不雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng),顏色深淺不蛋白質(zhì)濃度成正比。
3、如果想采用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測定,應(yīng)于540nm波長處的吸光值,如無540nm,520~562nm之間的波長也可,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品的蛋白濃度。
注意事項(xiàng):
1、待測蛋白和蛋白標(biāo)準(zhǔn)加入雙縮脲試劑后,如果収現(xiàn)檢測效果丌佳,可以室溫放置1h或60℃放置15min,顏色會隨著時間的延長丌斷加深。顯色反應(yīng)也會隨溫度升高而加快。
2、檢測中収現(xiàn)所有孔都呈暗紫色,可能原因是樣品含有還原劑,應(yīng)適當(dāng)透析或稀釋樣品。
3、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。