酸性L-G培養(yǎng)基基礎(chǔ)使用說明書
2022-02-15 14:30 作者:洛辰 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
中文名:酸性L-G培養(yǎng)基基礎(chǔ)
英文名稱:Acid L-G Medium Base
產(chǎn)品規(guī)格:250g
用途:用于堿性物質(zhì)處理的結(jié)核桿菌標(biāo)本。
成分(g/ 600ml):
磷酸二氫鉀 14.0
硫酸鎂 0.24
檸檬酸鎂 0.6
L-谷氨酸鈉 7.2
孔雀綠 0.4
馬鈴薯淀粉 30.0
用法
稱取本品 52.44g,并吸取甘油12ml,加熱攪拌溶解于 600ml蒸餾水中,煮沸 5-10 分鐘,121℃高壓滅菌 15 分鐘取出。待冷至55℃左右時,以無菌操作加入無菌攪勻的全蛋液 1000ml,混勻 ( 避免產(chǎn)生氣泡 ),分裝18 mm × 180mm 試管,每管 7ml,置成長斜面 ,用 85 - 90℃流動蒸汽處理1-1.5小時后,取出放冷備用。
結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis)簡稱為結(jié)核桿菌(tubercle bacilli),是人類結(jié)核病的病原體。結(jié)核分枝桿菌為細(xì)長略帶彎曲的桿菌,大小1~4X0.4μm。牛分枝桿菌則比較粗短。分枝桿菌屬的細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量較高,約占干重的60%,大量分枝菌酸(mycolic acid)包圍在肽聚糖層的外面,可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用齊尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法,以5%石炭酸復(fù)紅加溫染色后可以染上,但用3%鹽酸乙醇不易脫色。若再加用美藍(lán)復(fù)染,則分枝桿菌呈紅色,而其他細(xì)菌和背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。本菌無芽孢、無鞭毛。
培養(yǎng)特性:專性需氧。最適溫度為37℃,低于30℃不生長。結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁的脂質(zhì)含量較高,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收,故生長緩慢。結(jié)核菌在含氧40%~50%并有5%~10%CO2和溫度為36℃±5℃,合適PH值為6.8~7.2的條件下生長旺盛。在一般培養(yǎng)基中每分裂1代需時18~24小時,營養(yǎng)豐富時只需5小時。